Ключавая розніца - Flow Cytometry vs FACS

У кантэксце клетачнай тэорыі клеткі з'яўляюцца асноўнай структурнай і функцыянальнай адзінкай усіх жывых арганізмаў. Сартаванне клетак - гэта метадалогія, якая выкарыстоўваецца для падзелу розных клетак у адпаведнасці з фізіялагічнымі і марфалагічнымі асаблівасцямі. Яны могуць мець ўнутрыклеткавыя або пазаклеткавыя характарыстыкі. Узаемадзеянне ДНК, РНК і бялкоў разглядаецца як унутрыклеткавыя інтэрактыўныя ўласцівасці, а форма, памер і розныя павярхоўныя вавёркі разглядаюцца як пазаклеткавыя ўласцівасці. У сучаснай навуцы метадалогіі сартавання клетак прывялі да аказання дапамогі розным даследаванням у біялагічных даследаваннях, а таксама да стварэння новых прынцыпаў праз даследаванні ў галіне медыцыны. Сартаванне клетак праводзіцца па розных метадалогіях, якія ўключаюць як прымітыўныя з меншым абсталяваннем, так і перадавыя тэхналагічныя метадалогіі з выкарыстаннем складаных машын. Праточная цітометрыя, сартаванне клетак флуарэсцэнтнай актывацыі (FACS), падбор магнітных клетак і сартаванне адной клеткі - асноўныя выкарыстаныя метадалогіі. Праточная цитометрия і ФАКС распрацаваны для дыферэнцыявання клетак у залежнасці ад іх аптычных уласцівасцей. FACS - гэта спецыялізаваны тып праточнай цытаметрыі. Праточная цитометрия - гэта метадалогія, якая выкарыстоўваецца пры аналізе гетэрагеннай папуляцыі клетак у адпаведнасці з рознымі малекуламі клеткавай паверхні, памер і аб'ём якіх дазваляюць даследаваць адзінкавыя клеткі. FACS - гэта працэс, пры якім узоры сумесі клетак сартуюць у залежнасці ад характарыстык рассейвання святла і флуарэсцэнцыі ў два і больш кантэйнеры. У гэтым і заключаецца ключавое адрозненне патоку цитометрии ад ФАКС.

СОДЕРЖАНИЕ

1. Агляд і ключавая розніца 2. Што такое патокавая цитометрия 3. Што такое ФАКС 4. Падабенства паміж патокавай цитометрией і ФАКС 5. Паралельнае параўнанне - патокавая цитометрия супраць ФАКС у таблічнай форме 6. Рэзюмэ

Што такое патокавая цитометрия?

Праточная цитометрия - гэта метад, які выкарыстоўваецца для вывучэння і вызначэння экспрэсіі ўнутрыклеткавых малекул і клеткавай паверхні, а таксама для вызначэння і характарыстыкі розных тыпаў клетак. Ён таксама выкарыстоўваецца для вызначэння аб'ёму клетак і памеру клетак і для ацэнкі чысціні субпапуляцый, якія вылучаюць. Гэта дазваляе шматпараметрычную ацэнку асобных вочак прыблізна ў адзін і той жа час. Праточная цитометрия выкарыстоўваецца пры вымярэнні інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі, якая выпрацоўваецца дзякуючы флуарэсцэнтна мечаным антыцелам, якія дапамагаюць ідэнтыфікаваць вавёркі або ліганды, якія звязваюцца з асацыяванымі клеткамі.

Як правіла, патокавая цытаметрыя ўключае ў асноўным тры падсістэмы. Гэта флюідыкі, электроніка і оптыка. У праточнай цытаметрыі даступныя пяць асноўных кампанентаў, якія выкарыстоўваюцца ў сартаванні клетак. Яны ўяўляюць сабой праточную ячэйку (струмень вадкасці, якая выкарыстоўваецца для іх транспарціроўкі і выраўноўвання ячэйкі для працэсу аптычнага зандзіравання), сістэму вымярэнняў (могуць быць розных сістэм, у тым ліку ртутныя і ксенонавыя лямпы, вадзяныя астуджаныя з вялікай магутнасцю ці лазеры малога магутнасці з паветраным астуджэннем або дыёдныя лазеры), АЦП; Сістэма аналагавага лічбавага пераўтваральніка, сістэма ўзмацнення і кампутар для аналізу. Збор - гэта працэс, пры якім дадзеныя збіраюцца з узораў пры дапамозе праточнага цытометра. Гэты працэс апасродкаваны кампутарам, які звязаны з праточным цытаметрам. Праграмнае забеспячэнне, прысутнае ў камп'ютэры, аналізуе інфармацыю, пададзеную на кампутар з праточнага цытометра. Праграмнае забеспячэнне таксама мае магчымасць карэктаваць параметры эксперыменту, якія кантралююць праточны цытометр.

Што такое FACS?

У кантэксце праточнай цытаметрыі сартаванне клетак з дапамогай флуарэсцэнцыі (FACS) - гэта метад, які выкарыстоўваецца пры дыферэнцыяцыі і сартаванні ўзору сумесі біялагічных клетак. Клеткі аддзяляюць ад двух і больш кантэйнераў. Метад сартавання заснаваны на фізічных асаблівасцях клеткі, які ўключае ў сябе характарыстыкі рассейвання святла і флуарэсцэнцыі клеткі. Гэта важная навуковая методыка, з дапамогай якой можна атрымаць надзейныя колькасныя і якасныя вынікі сігналаў флуарэсцэнцыі, якія выпраменьваюцца з кожнай клеткі. Падчас ФАКС, першапачаткова, загадзя атрыманая сумесь клетак; падвеска накіравана ў цэнтр вузкага патоку вадкасці, які імкліва цячэ. Паток вадкасці распрацаваны для таго, каб аддзяліць клеткі ў завісі з улікам дыяметра кожнай клеткі. Механізм вібрацыі наносіцца на струмень завісі, у выніку якога ўтвараюцца асобныя кроплі.

Сістэма калібруецца, каб стварыць адну кроплю з адной вочкай. Непасрэдна перад утварэннем кропель, праточная суспензія рухаецца ўздоўж апарата вымярэння флуарэсцэнцыі, які вызначае флуарэсцэнцыю, характэрную для кожнай клеткі. У месцы ўтварэння кропель усталёўваецца электрычнае зараднае кольца, якое зараджаецца да кольца перад вымярэннем інтэнсіўнасці флуарэсцэнцыі. Пасля таго, як кроплі ўтвараюцца з патоку падвескі, у кроплях трапляе зарад, які затым трапляе ў сістэму электрастатычнага адхілення. Згодна з зарадкай, сістэма пераадрасоўвае кроплі ў розныя ёмістасці. Спосаб прымянення платы вар'іруецца ў залежнасці ад розных сістэм, якія выкарыстоўваюцца ў FACS. Абсталяванне, якое выкарыстоўваецца ў FACS, вядома як сартавальнік клетак, які актывуецца флуарэсцэнцыяй.

Якое падабенства паміж патокам цытаметрыі і ФАКС?


  • Праточная цитометрия і ФАКС распрацаваны для дыферэнцыявання клетак у залежнасці ад іх аптычных уласцівасцей.

У чым розніца паміж патокавай цитометрией і ФАКС?

Рэзюмэ - Flow Cytometry vs FACS

Клетка з'яўляецца асноўнай структурнай і функцыянальнай адзінкай усіх жывых арганізмаў. Сартаванне клетак - гэта працэс, дзякуючы якому клеткі вылучаюць і дыферэнцыруюць у розныя катэгорыі, у залежнасці ад іх ўнутрыклеткавых і пазаклеткавых уласцівасцей. Праточная цитометрия і FACS - дзве важныя методыкі сартавання клетак. Абодва працэсу распрацаваны для дыферэнцыявання клетак у залежнасці ад іх аптычных уласцівасцей. Праточная цитометрия - гэта метадалогія, якая выкарыстоўваецца пры аналізе гетэрагеннай папуляцыі клетак у адпаведнасці з рознымі малекуламі клеткавай паверхні, памер і аб'ём якіх дазваляюць даследаваць адзінкавыя клеткі. FACS - гэта працэс, пры якім узоры сумесі клетак сартуюць у залежнасці ад характарыстык рассейвання святла і флуарэсцэнцыі ў два і больш кантэйнеры. Гэта розніца паміж Flow Cytometry і FACS.

Спампаваць PDF версію Flow Cytometry vs FACS

Вы можаце спампаваць PDF-версію гэтага артыкула і выкарыстоўваць яе ў аўтаномных мэтах у адпаведнасці з цытатай. Калі ласка, запампуйце PDF версію тут. Розніца паміж Flow Cytometry і FACS

Даведка:

  1. Праточная цітометрыя (FCM) / FACS | Сартаванне клетак з дапамогай флуарэсцэнцыі (FACS). Доступ 22 верасня 2017. Даступны тут Ібрагім, Ф. Шеррыф і Гер ван дэн Энг. "Праточная цытаметрыя і сартаванне клетак". SpringerLink, Springer, Берлін, Гейдэльберг, 1 студзеня 1970. Доступ да 22 верасня 2017. Даступны тут

Здымкі:


  1. "Цитометр" Кірано - ўласная праца, (CC BY 3.0) праз Commons Wikimedia "Флюарэсцэнтная сартаванне клетак (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Распрацоўка мадэлі ў натуральных умовах для вывучэння ўзаемадзеяння Equus caballus IgE з яго высокім сродствам рэцэптарам FcεRI (кандыдацкая дысертацыя), Шэфілдскі ўніверсітэт, (CC BY-SA 3.0) праз Wikimedia Commons